提rna需要订多少干冰

常规RNA提取所需试剂及配制

原理：酵母核酸中RNA含量较多。RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，是用氢氧化钠使酵母细胞壁变性、裂解，然后用酸中和，除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀RNA。提取的RNA有不同程度的降解。由此即得到RNA的粗制品。

许多植物组织特别是植物的果实（如苹果、樱桃、李子、葡萄等）和树木类植物中富含酚类化合物。酚类物质的含量会随着植物的生长而增加。因而从幼嫩的植物材料中更容易提取RNA。

总RNA提取试剂盒步骤：样品处理：a. 植物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混匀。b. 动物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液，用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。c. 贴壁细胞：直接在培养板中加入裂解液裂解细胞，每106细胞加1ml 裂解液。

实验一：细胞中总RNA的提取及鉴定 目的：掌握Trizol提取总RNA的原理和步骤，学习电泳鉴定总RNA的方法。原理：RNA是核酸，具有较好的水溶性。提取RNA 破碎细胞，然后用提取液将RNA溶出，反复抽提去除蛋白质，加入乙醇沉淀RNA，将RNA沉淀溶解备用。

RNA抽取一般使用Trizol法抽提：Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理：在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。

死叶片能提RNA吗

RNA抽取一般使用Trizol法抽提：Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理：在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。

防止提取的RNA被RNA酶降解。RNA酶无处不在，很容易导致提取工作前功尽弃，为了获取到高质量的刺五加总RNA，以叶片为试材，比较不同提取方法的提取效果。

可 rna降解主要由内外源rna酶造成 内源酶很“顽强” 虽然在完整组织里它们基本不开工 但细胞一破 即使是冻过的材料 化冻过程里 它们也活跃工作，提取过程中 速磨（破碎）、速加酶灭活剂 速混匀，很关键。 超低温冰箱在保持期间一般能完全让其停工，化冻了提取过程中还是又活回来。

因为CTAB法提取的DNA总会或多或少地有RNA残留，并不影响一般的PCR实验。如果有特殊实验需要去除RNA，常用的方法是加RNA酶进行消化。

绿色植物叶片提取的RNA中可能含有大量的叶绿体RNA，23s，15s等。所以这个结果可能是正常的。当然因为没有marker，也不排除部分RNA出现降解。

你需要研究植物哪个部位的基因，就提取哪个部位的RNA。不同部位的RNA总类是不一样的，小型植物可以取整株，大型植物就看你研究的目的。植物组织越新鲜，越好提取。

提rna步骤

1、提rna步骤：样本前处理。室温静置5分钟，让RNA可以充分释放。按 1 mL Trizol 加入 200 μL 氯仿，盖好管盖。用手剧烈震荡 15秒，室温放置 3分钟。12000 g、4℃离心 15分钟。小心转移上清液（约500 μL）至新的 5 mL 无酶离心管中。加入等体积异丙醇，室温静置10分钟。

2、提取组织RNA1．准备好冰盒、5mlEP管(无RNA酶)、剪刀及镊子（需消毒，再用灭菌纯水和DEPC水洗净）、钻头、灭菌纯水等。取出冻存管，剪取约0.5cm放于EP管。

3、．提取 称取鲜酵母 159或干酵母粉 5g，倒入 100ml三角瓶中，加 NaCl 5g，水25ml，搅拌均匀，置于沸水浴中提取lh。2．分离 将上述提取液用自来水冷却后，装入大离心管内，以4000r／min离心10min，使提取液与菌体残渣等分离。