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发布时间:2025-08-20 点此:70次
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源自美国农业部昆虫病理实验室的sf9细胞系,是杆状病毒表达的理想选择,源自秋蝇蛹卵巢组织的IPLBSF-21细胞系。这种细胞的独特之处在于其规则的球形结构,既可悬浮培养,也可贴壁生长,最适宜的生长条件是pH2,温度保持在27 28℃,3天左右进行一次传代。
KOH调pH到2-4过滤除菌,4℃保存。完整培养液在使用前加入10%热灭活的胎牛血清。传代:用吸液管吹洗细胞使其悬浮,或用手从侧面拍打细胞培养瓶(当用大细胞培养瓶时)重悬细胞。(当用来接种的细胞重悬前就有很多细胞漂浮,要吸掉漂浮细胞及旧培养液,加入新培养液重悬细胞。
nm左右。sf9是一种生物学实验常用的昆虫细胞,通常作为昆虫平台用来生产各种蛋白、病毒,或用于基础研究。sf9 是Spodoptera frugiperda cell 的缩写,即草地贪夜蛾细胞,草地贪夜蛾也称草地夜蛾。
真核细胞通常悬浮在带有血清和冷冻剂的培养基内,保存在-196°C 的液氮中。如果是商业订购的,通常储存在用干冰包裹的冻存管中。所以冻存后的细胞必须快速解冻后立即培养,以获得最大的生存能力,为了除去冻存时的添加剂, 24 小时后要更换培养基。
WRL68是目前唯一能提供的人正常干细胞,之前很多人一直在问LO2,但是就目前情况来说,LO2在建系的时候就被海拉细胞污染了,所以基本无法提供,所以WRL68的重要性就凸显出来了。
运输保存: 采用干冰保存运输收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
客户收到细胞后,从干冰中取出放入液氮中保存,待实验安排好后,解冻后即可以进行复苏培养。U266细胞;人骨髓瘤细胞采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
请在收到细胞后,先检查包装是否完整,干冰是否充足,冻存管有无破损等情况,并核对细胞管上的标签信息,细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况,请及时与我们联系。低温保存的细胞非常脆弱,收到的细胞如24h内复苏,可存放于-80℃冰箱;超过24h请存放于液氮中。
具体步骤:细胞复苏 将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。
材料 培养基, 37’C 预热 培养瓶 装有70 %乙醇的烧杯 1ml 、10ml 的移液管、移液器及移液头 步骤 把冻存细胞的管子在37’C 的水浴融化,快速摇动, 1分钟内使管内的细胞融化。把融化的管子浸入装有70 %乙醇的烧杯内,整个实验在超净台内进行。
操作步骤 (一)冻存 消化细胞(同实验二),将细胞悬液收集至离心管中。1000rpm离心10分钟,弃上清液。沉淀加含保护液的培养,计数,调整至5×106 ml左右。将悬液分至冻存管中,每管1 ml。将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。
细胞可以直接放到液氮罐中冻存吗 不 这样做会使细胞突然遭受到极端的低温,可能会导致细胞内部结冰和细胞膜破裂,从而对细胞的完整性和功能造成严重损害。相比之下,逐渐降温法是一种更可行的冻存细胞方法。 需要进行细胞消化,使用适当的消化酶将细胞从培养基或生物样品中分离出来。
直接将细胞放入液氮是不适宜的,因为这样的操作会迅速导致细胞冻结并可能损坏其结构。 通常,我们会将细胞置于特定的培养液中,并使用冻干管进行保存,然后再放入液氮中以维持其存活状态。 希望我的解释能够帮助您更好地理解细胞冻存的过程。
运输和保存: 可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。细胞用途: 仅供科研使用。
其实我不是很明白你的意思,如果是直接把细胞放入液氮肯定是不行的,直接放入液氮中的细胞肯定会对细胞造成不可逆转的损坏。一般我们还是把细胞直接放入相应培养液的冻干管中,然后放入液氮进行存储的。不知道我的回答你是否满意。
班德液氮罐为您答疑解惑:细胞的冻存和复苏一般是遵守“慢冻快融”。常规的慢冻方法是:先将冻存管放入4℃冰箱,约40min。接着置于-20℃冰箱,约30~60min。置于-80℃超低温冰箱中放置过夜。置于液氮罐中长期保存。
该细胞表达S-100;产生生长激素;糖皮质激素作用下可以产生磷酸甘油脱氢酶。运输保存: 采用干冰保存运输收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
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