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发布时间:2025-12-18 点此:111次
你好!这当然是正常的。因为细胞本身有重量,在重力作用下都会进行沉降,这在冻存的时候是不会对细胞产生影响的。细胞冻存一般是:4℃30min,-20℃30min,-80℃过夜,之后放于液氮保存。要注意冻存细胞的配比,中间应加入DMSO防冻剂,注意配比,同时加入胎牛血清(不同细胞比例不同)。
因为蛋白质在低温或较高温度以及盐溶液中会析出,产生类似的蛋白沉淀物。
而经过热灭活的血清,沉淀物的形成会显著增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。除非是在做免疫学研究或培养干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,才推荐做热灭活。
可以放一个月。需要长期保存的胎牛血清须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中。
短期储存在4℃环境内对培养细胞没有影响。但是反复冻融会对血清中的蛋白物质有伤害。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛,小牛血清取自出生10-30天的小牛。

为了保持血清的活性,建议在-5到-30℃的冷冻条件下储存,对于频繁使用,可选择在-20℃长期保存,但请注意,4℃下存储不应超过一个月。使用时,确保在2-8℃冰箱中缓慢解冻并均匀摇晃,以防止蛋白质降解。功能与优势 Gibco澳洲胎牛血清10099141C不仅仅是血清,它提供了一套全面的支持。
HEK-293T细胞是293T(293tsA1609neo)细胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。细胞持续表达SV40抗原,该细胞常用于转染实验,转染效率较高。
HEK293细胞极少表达细胞外配体所需的内生受体,且比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株:293T 17的转染效率更高,成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。
细胞是用5型腺病毒75株系转化,含有Ad5 E1区的人胚肾亚三倍体细胞系,是一种E1区缺陷互补细胞系。它是加拿大McMaster University的F.L.Graham与J.S.Miley于1976年用DNA转染技术构建而成。
现在国外进行STR分析,国内很多细胞交叉污染,已不是命名的那个细胞的,要想检测也不方便。293T是正常的人胚肾细胞,是从胚胎提取的肾细胞。你可以到ATCC的网站上对照图片看,形态相差大就值得怀疑,做实验就要谨慎了。
和HEK293是同一种细胞,它们的全称是Human Embryonic Kidney 293 cell 即人类胚胎肾细胞。293还有一种衍生的293T细胞:293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株,即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增,从而促进表达载体的扩增,促进蛋白的表达。
对于做分子生物学实验的人来说,293细胞再熟悉不过了。常在文献中看到不同的293名字,全然没考虑过293细胞原来还是团队作案,分身无数。
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